A Espectroscopia para o uso do UV-Vis está entre as técnicas mais utilizadas em um laboratório. Isso porque ela é de fácil utilização, rápida resposta e altamente confiável.
Trazemos algumas dicas, para que você possa garantir a confiabilidade da técnica:
- Mantenha o instrumento alojado em um ambiente livre de poeira, com ar-condicionado e longe da luz solar direta. Mantenha a bancada de trabalho sempre limpa.
- Quando não estiver em uso, cubra com a tampa plástica fornecida pelo fabricante;
- Evitar proximidade de motores, centrífugas ou outros equipamentos capazes de produzir vibrações;
- Desligue o instrumento quando não estiver em uso para conservar a vida útil da lâmpada;
- Limpe imediatamente o compartimento de amostra, em caso de derramamentos. Retire o máximo de líquido possível com a ajuda de uma seringa, seguida de algodão macio esterilizado;
- Substitua as fontes de luz nos intervalos de uso prescritos ou sempre que a tela exibir uma mensagem de erro.
- Verifique o desempenho do instrumento em relação aos padrões de referência em intervalos regulares;
- Manuseio e cuidados com as cubetas;
- Os suportes ou cubetas de amostra e de referência devem ser um par correspondente. Isso significa que as propriedades de transmissão óptica das janelas de transmissão de luz do par são as mesmas;
- Não use cubetas que apresentem rachaduras ou linhas finas nas janelas transparentes;
- As amostras não devem ser degaseificadas dentro das cubetas, pois a formação de bolhas nas superfícies internas pode contribuir para erros;
- Cubetas de plástico não devem ser usadas com solventes orgânico. Avaliar a compatibilidade da cubeta com a amostra;
- Não use cubetas descartáveis, pois elas podem afetar grosseiramente a reprodutibilidade dos resultados devido a imperfeições.
- Mantenha o compartimento de amostra fechado durante as medições para evitar que a luz externa introduza erros.
Dicas para uso do UV-Vis: Cubetas para análise
- Como escolher a cubeta certa para análise?
Escolher a cubeta certa envolve selecionar o material certo e o tamanho correto com base em sua amostra e instrumentação.
O material da cubeta deve ter uma transmissão suficiente em um determinado comprimento de onda. Contudo a atenuação da luz nas paredes da cuvete não deve afetar o resultado de uma análise. Cubetas de vidro não são usadas na região UV para análise abaixo de 370 nm, pois absorvem a radiação. Sendo assim recomenda-se usá-los apenas na região visível.
A tabela a seguir fornece as faixas de transmissão utilizáveis das cubetas:
O tamanho das cubetas também afeta a capacidade de medição. O comprimento nominal do caminho de radiação da cubeta é de 10 mm. Dependendo das amostras, o comprimento pode variar de 1 mm a 100 mm.
Cubetas padrão podem ser usadas para a maioria das amostras em estudo. Desse modo, as cubetas comuns de absorção e fluorescência têm uma base externa de 12,5 mm x 12,5 mm, uma altura de 45 mm e dimensões internas de 10 mm x 10 mm.
Use cubetas de caminho longo (cuvetes com um comprimento de caminho superior a 10 mm) quando a amostra estiver muito diluída, vaporizar ou sofrer alteração química durante o processo de medição.
Portanto as cubetas de trajeto curto (cuvetes com um comprimento de trajeto inferior a 10 mm) são usadas quando a absorbância é alta e a diluição é difícil.
Dicas para uso do UV-Vis: como manusear as cubetas corretamente?
Ao manusear cubetas, transporte-as sempre pelos lados foscos. Evite tocar as superfícies ópticas transparentes com os dedos, pois as impressões digitais podem causar absorção significativa e, portanto, afetar a precisão.
Evite usar pipetas Pasteur de vidro para encher a cubeta, pois elas podem riscar a superfície óptica causando mais interferência. Pipetas com pontas de plástico descartáveis são recomendadas.
Dicas para uso do UV-Vis: limpeza das cubetas
A limpeza das cubetas tem um grande efeito nos resultados, por isso devemos considerar isso como um fator muito importante.
Recomendamos os seguintes passos para realizar uma limpeza profunda de cubetas de quartzo:
- Mergulhe as cubetas na solução de limpeza;
- Retire a solução de limpeza e lave as cubetas com água deionizada;
- Lave as cubetas com etanol ou acetona, exceto nos casos de proteínas (ver tabela abaixo).
- Seque as cubetas limpando com um tecido sem fiapos seguido de secagem ao ar ou secagem na estufa com baixa temperatura.
Dicas para uso do UV-Vis: Soluções de limpeza
- Soluções aquosas: Partes iguais em volume de HCl 3 M e etanol ou lavar com ácido nítrico 50% – 10 minutos
- Moléculas orgânicas: HNO3 concentrado ou HCl 2 M – 10 minutos
- Partículas de difícil remoção: Partes iguais em volume de etanol e HCl 3 M – 30 segundos
- Proteínas: Incubar à temperatura ambiente com tripsina (Etanol e acetona não são recomendados para limpeza.) – Pernoite
- Metais pesados: Partes iguais em volume de ácido sulfúrico 2 M e 50% de água deionizada ou Água régia – 20 minutos
- Ácidos graxos: Partes iguais em volume de IPA e água deionizada
O tempo de imersão indicado é uma estimativa aproximada. No entanto, recomenda-se apenas deixar as cuvetes de molho até que as manchas/contaminantes sejam removidas.
Para limpar as cubetas de vidro, enxágue-as com acetona ou etanol e, em seguida, enxágue abundantemente com água. Recomendamos que você deixe as cubetas secarem ao ar.
Dessa forma, você pode lavar as cubetas de plástico várias vezes com água deionizada. Não recomendamos a lavagem de cubetas de plástico com produtos químicos.
Sempre usar EPI’s adequados como luvas, para manuseio, e óculos de segurança em casos específicos.
Se você quer saber mais sobre o assunto dicas para o uso de UV-Vis, registre seu interesse em adquirir nosso Curso Livre @ Distância de Espectroscopia UV-Vis, com preço de lançamento, clicando aqui!
Fontes:
– Treinamento Personalizado de Espectroscopia UV-Vis, da Amoreira Treinamentos
Por Pedro Alexandre
